一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
1. 產(chǎn)品名稱：小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
2. 組織來(lái)源：皮膚組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105 cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4. 細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮
下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)
內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈
性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋
白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞（MEC）在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長(zhǎng)、創(chuàng)面
愈合過(guò)程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細(xì)胞、真皮成
纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們對(duì)這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。
與之相比，對(duì)參與創(chuàng)面愈合過(guò)程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞，則
因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。
本公司生產(chǎn)的小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)
合密度梯度離心法、最后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量
約為5×105 cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含
有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用完全培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-M201）作
為體外培養(yǎng)小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)基。
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳2-3代左右；建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待
細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技
術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們
聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到
解決。
5. 該細(xì)胞只可用于科研。
備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考
